厌氧培养箱应安放在温差较小、操作方便的位置，应避免阳光直晒和远离采暖设备，放置平稳；将混合气瓶、氮气瓶安放平稳，并分别装好减压阀（含压力表），安置在适当位置；接上气路并检查气路，为防止漏气，必要时可在各接管处用密封胶粘合。
　　厌氧培养箱的菌种置入和培养：
　　1.检查取样室内门并关紧；
　　2.打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；
　　3.取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，后关掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束；
　　4.如选定真空度较低就需要增加置换的次数；
　　5.取样室内外门开启、关紧，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）检验；
　　6.厌氧培养箱需要长期连续使用的条件：
　　·每天在操作室内打开美兰指示剂观察，如不正常就必须重新换气；
　　·要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10ml左右；
　　·连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。
　　7.操作室内培养室内室温度可任意选择和控制。
　　8.混合气瓶、氮气瓶输出压力调整：调节减压阀，使输出压力0.1Mpa左右。